تولید آنتی بادی پلی کلونال علیه سلول های p۳۸۸d۱

سابقه و هدف: تکنیک های هم کشت ( co-culture ) در مطالعه تاثیرات متقابل سلولها نقش مهمی دارند. قابلیت افتراق بین جمعیت های سلولی هم کشت شده در ارزیابی این نوع کشت نقش اساسی دارد. سلول های p388d1 از گروه سلول های شبه ماکروفاژی هستند ولی ظاهری شبیه لنفوبلاست دارند. در ارزیابی هم کشت سلول های p388d1 و سلول های مغز استخوان، تفاوت در آنتی ژن های سطحی این دو جمعیت سلولی می تواند به افتراق آنها کمک کند. هدف از این تحقیق تهیه آنتی بادی است که بتوان به وسیله آن سلول های p388d1 را از سلول های مغز استخوان افتراق داد. مواد و روش ها: جهت تهیه آنتی بادی علیه سلول های p388d1 ، ایمن سازی خرگوش به وسیله تزریق داخل صفاقی و داخل وریدی این سلول ها انجام شد. بعد از خونگیری، ایمونوگلوبولین های سرم خرگوش به دفعات متعدد در محلول سولفات آمونیوم رسوب داده شدند. قبل و بعد از رسوب دهی، الکتروفورز پروتئین های سرم و تعیین مقدار آنها با روش برادفورد انجام شد. آنتی بادی های دارای واکنش متقاطع با سلول های مغز استخوان به وسیله چندین بار عمل جذب توسط سلولهای مغز استخوان حذف شدند. در مراحل مختلف جذب، حضور آنتی بادی های ضدسلولی با استفاده از روش ایمو نوفلورسانس غیر مستقیم تعیین گردید و قدرت کشندگی آنتی بادی ها با واسطه کمپلمان نیز مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته ها: محلول آنتی بادی جذب شده ای که در آزمایشات ایمو نو فلورسانس غیر مستقیم هیچ واکنشی علیه سلول های مغز استخوان نشان نمی دهد، واجد آنتی بادی هایی بر علیه سلول های p388d1 می باشد که قادر به کشتن با واسطه کمپلمان این سلول ها می باشند. نتیجه گیری و توصیه ها: آنتی بادی های تهیه شده در این تحقیق را می توان به منظور تعیین جمعیت سلول های p388d1 یا حذف این سلول ها ازجمعیت سلول های مغز استخوان استفاده نمود.